Viendomeninių rekombinantinių monokloninių antikūnų funkcinis charakterizavimas
Krasko, Jan Aleksander | Recenzentas / Rewiewer |
Variabilūs sunkiosios grandinės antikūnų domenai (VHH), tai rekombinantiniai antikūnai pasižymintys unikaliomis savybėmis, lyginant su konvenciniais antikūnais - mažu molekulės dydžiu (~15kDa) bei imunogeniškumu, geru cheminiu stabilumu. Savo kompaktiškumo dėka nanokūneliai gali būti reiškiami tiek prokariotinėse, tiek eukariotinėse sistemose. Dėl šių unikalių savybių VHH yra tinkami kandidatai diagnostinių bei terapinių įrankių ir sistemų kūrimui. Norint įvertinti šių molekulių charakteristikas ir funkcionalumą yra svarbūs aktyvumo tyrimai. Šio darbo tikslas buvo sukurti analitinį metodą, kuris įgalintų VHH molekulių funkcinį charakterizavimą. Tyrimo metu buvo nustatyta, kad analizuoti monomeriniai rekombinantiniai VHH antikūnai pasižymi mažu afiniškumu, tačiau dimerinių bei polimerinių nanokūnelių kolekyvinė sąveika, pasireiškianti per avidiškumą, yra pakankamai stipri ir leidžia specifiškai atpažinti tiriamąsias analites. Darbą sudaro 6 dalys: įvadas, literatūros analizė, metodinė dalis, rezultatai, išvados, literatūros sąrašas. Darbo apimtis - 69 p. teksto be priedų, 35 iliustr., 73 bibliografiniai šaltiniai.
Variable domains of heavy-chain antibodies (VHH) are recombinant antibodies which have unique properties when in comparison with conventional antibodies - small in size (~15 kDa), low immunigenicity, good chemical stability. Due to compact nature nanobodies can be expressed both in procaryotic and eucaryotic systems. In regards to these unique characteristics VHH antibodies are proper candidates for development of diagnostic, therapeutic tools and systems. Potency assays are important when evaluating characteristics and functionality of these molecules. The aim of this thesis was to develop an analytical method which would enable functional characterization of VHH molecules. During the study it was found that monomeric recombinant VHH antibodies of choice have low afinity although collective interaction of dimeric and polymeric nanobodies through avidity is relatively strong and enables detection of target analytes. Structure of the thesis: introduction; literature review; materials and methods; results; conclusions; references.Thesis consists of: 69 p. text without appendices, 35 figures, 73 bibliographical entries.