Fermentacijos procesų optimizavimas ir ląstelių charakterizavimas
Pelių hibridomos ląstelės yra gaunamos suliejus antikūnus sekretuojančias B-limfocitų ląsteles su vėžinėmis ląstelėmis. Gautos ląstelės geba sintetinti specializuotus monokloninius antikūnus bei pasižymi vėžinėms ląstelėms būdingomis savybėmis - ilgaamžiškumu bei greita ir neribota proliferacija. Dėl šių savybių hibridomos gali būti pritaikytos biotechnologiniuose procesuose gaminant monokloninius antikūnus. Dėl didėjančios antikūnų paklausos ir nedidelės gamybos proceso išeigos kyla rizika nepatenkinti augančio poreikio. Fermentacija yra vienas iš pirminių ir pagrindinių proceso etapų, kurį modifikuojant gali būti pasiekta didesnė produkto išeiga.Siekiant optimizuoti fermentacijos procesą šiame darbe buvo išanalizuoti dviejų hibridomos linijų augimo profiliai. Kultivavimo metu vertintas ląstelių gyvybingumo ir tankio kitimas, pagrindinių maistinių medžiagų suvartojimas bei metabolitų susidarymas ir sintetinamo antikūno koncentracijos pokyčiai. Atliekant eksperimentus įvertintas abiejų ląstelių linijų atsakas į papildomą maistinių medžiagų pridėjimą, tirta temperatūros įtaka sintetinamų antikūnų išeigai. Atlikus darbą nustatyti ląstelių augimą limituojantys veiksniai bei atrasta strategija, kuri gali būti pasitelkiama siekiant padidinti fermentacijos proceso išeigą.
Mouse hybridoma cells are obtained from the fusion of antibody-secreting B-lymphocytes and cancer cells. These cells are able to synthesize specialized monoclonal antibodies and have the characteristics of cancer cells such as longevity, fast and unlimited proliferation. Due to these properties, hybridomas can be applied in biotechnological processes to produce monoclonal antibodies. Increasing need for antibodies and low yield of production process poses a risk of not meeting the growing demand. Fermentation is one of the primary and main stages of the process, which can be modified to achieve greater product yield.In order to optimize fermentation process, growth profiles of two hybridoma lines were analyzed. During cell growth, changes in cell viability, density, antibody concentration, main nutrient intake and metabolite formation were observed. In further experiments, the response to the addition of nutrients of both cell lines and the influence of temperature on the yield of synthesized antibodies were also investigated.This work has determined what factors can limit the growth of cells and what strategy can be used to increase the yield of fermentation process.