Insulino amiloidinių fibrilių agregacijos slopinimo gosipetinu mechanizmas
Tauraitė, Daiva | Recenzentas / Rewiewer |
Amiloidinės fibrilės pasižymi dideliu stabilumu, yra tiesios, nešakotos, apie 10 nm pločio, mikrometrų ilgio, beta klostėmis turtingos netirpios struktūros. Netinkamai susivyniojus tirpiems baltymams gali susidaryti β-klostes turinčios molekulės, kurios agreguojasi ir sudaro amiloidus. Tiek natyvaus baltymo funkcijos netekimas, tiek agregatų citotoksiškumas sukelia daugiau nei 40 neurodegeneratyvinių ligų, tokių kaip Alzhaimerio ar Parkinsono ligos. Dėl to labai svarbu ištirti šių struktūrų susidarymo mechanizmą, nustatyti galimus jų susidarymo slopinimo būdus ir rasti tinkamus slopiklius. Flavonas gosipetinas pasižymi slopinimo savybėmis, todėl šiame darbe siekiama nustatyti, kaip jo buvimas tirpale veikia fibrilių susidarymo mechanizmą. Kaip modelinis baltymas naudojamas insulinas, o agregacijos kinetika stebima naudojant dažą tioflaviną T.Nors gosipetinas, esant tirtai koncentracijai (0,6 mM), nėra visiškai tirpus, tačiau gauti rezultatai rodo, kad esant tokiam flavono kiekiui vyksta inhibicija. Toks efektas siejamas su galutiniu flavono kiekiu tirpale. Manoma, kad gosipetinas slopina insulino fibrilinių branduolių susidarymą ir ilgėjimo fazę.Darbo apimtis - 72 p. teksto be priedų, 30 iliustracijų, 5 lentelės, 20 grafikų, 60 bibliografinių šaltinių.
Amyloid fibrils have high stability, are straight, unbranched, about 10 nm wide, micrometers long, insoluble structure that contains beta-sheets. Improper overlap of soluble proteins can result in the formation of β-sheet rich molecules that aggregate and form amyloids. Both losses of native protein function and cytotoxicity of aggregates cause more than 40 neurodegenerative diseases, such as Alzheimer's or Parkinson's. It is therefore very important to determine the conditions under which the inhibition of the formation of these strong structures can take place. The flavone gossypetin has inhibitory properties, so the aim of this work is to determine how its presence in solution affects the mechanism of fibril formation. Insulin is used as a model protein and aggregation kinetics are monitored using a thioflavin T dye.Although gossypetin is not completely soluble at the tested concentration (0.6 mM), the results obtained indicate that this amount of flavone is causing inhibition. This effect is related to the final amount of flavone in the solution. Gossypetin is thought to inhibit the formation of fibrillar nuclei and the elongation phase.Structure: introduction, literature analysis, materials and methods, results and conclusions.The thesis consist of: 72 p. text without appendixes, 30 pictures, 5 tables, 20 graphics, and 60 bibliographical entries.