Tarpląstelinį užpildą imituojančių mikrostruktūrų taikymas audinių inžinerijai
Baigiamojo darbo metu buvo gaminami bei tiriami hidrogelinės mikrostruktūros pagamintos iš kiaulės kolageno ir metakriloksietilfosforilcholino (PC-MPC). Topografijos ant PC-MPC hidrogelio paviršiaus buvo suformuotos liejimo būdu. Buvo atliktas pagamintų hidrogelinių mikrošablonų patvarumo in vitro tyrimas ir parodyta, kad mikrostruktūros lieka nepakitusios. Išsamesniems tyrimams buvo pasirinkti hidrogeliai su 30, 60 ir 200 µm pločio grioveliais, griovelių gylis 20 µm. Mikrostruktūrinti hidrogeliai buvo tirti su žmogaus odos fibroblastais (ATCC BJ-5ta-GFP), buvo vertinta ląstelių proliferacija bei migracija. Proliferacijos tyrimas parodė, kad ląstelės ant mikrostruktūrintų hidrogelių morfologiškai skiriasi, bet neigiamo poveikio ląstelių proliferacijai mikrotopografijos neturi. Tiriant ląstelių migraciją buvo sukonstruotas biolustas, hidrogelis su grioveliais buvo apverstas struktūromis į apačią formuojant kanalus. Parodyta kad ląstelės migruoja kanalais ir juose išlieka gyvybingos 96 valandas.Parodyta kad hidrogelis tiksliai atkartoja submikrometrines liejimo formos struktūras . Tiriant ląsteles ant hidrogelių su submikrometrinėmis struktūromis ir fluoresencijoje vaizdinant aktiną, buvo parodyta, kad aktino sankaupos ląstelėje atkartoja hidrogelio topografinį reljefą.Darbą sudaro 7 dalys: įvadas, santrumpų sąrašas, literatūros apžvalga, medžiagos, metodai, aparatūra, tyrimo rezultatai ir aptarimas, išvados, literatūros sąrašas. Darbo apimtis - 40 p. teksto be priedų, 25 iliustr., 48 bibliografiniai šaltiniai.
The aim of this masters thesis was to manufacture and examine biocompatible microstructured hydrogels made of porcine collagen and methacryloyloxyethyl phosphorylcholine (PC-MPC). Molding was used to create microtopographies on the surface of PC-MPC hydrogel. The effect of in vitro experimental conditions on the hydrogel microstructures was evaluated and it was shown that microtopographies remain unaltered.For further testing, hydrogels with 30, 60 and 200 µm grooves were chosen, the depth of the structures was 20 µm. The microstructured hydrogels were tested with ATCC BJ-5ta-GFP cells, proliferation and migration were evaluated. Proliferation test results showed that though the morphology of the seeded cells differed from the native ones, there was no major difference in proliferation comparing to the cell count on TCP or flat MPC hydrogels. For cell migration, a biochip with a grooved hydrogel placed upside down was engineered, forming channels of different widths. It was shown that cells migrated into the channels and remained viable for 96 hours. Thus, the hydrogel successfully replicates submicrometer structures from the molding master. Cells were also tested on hydrogels with submicrometer topographies,. By visualizing actin it was shown that even actin accumulations tend to replicate the hydrogel surface topographies.Structure of the work: introduction, list of abbreviations, review of literature, materials, equipment, methods, results and discussion, conclusions, references. Thesis consists of: 40 p. text without appendixes, 25 pictures, 48 bibliographical entries.